Projet ANR IntpTN3

IntpTN3 Recombinase: Mechanism, Structure, Partners and Applications

Objectifs

Nous avons publié la découverte d'une nouvelle intégrase codée par un plasmide (IntpTN3) de l'archée anaérobie hyperthermophile Thermococcus nautili. En plus des propriétés canoniques d'intégration, d'excision et d'inversion spécifiques de site, cette recombinase à tyrosine affiche des activités sans précédent. IntpTN3 est responsable de la génération d'un certain nombre d'événements d'inversion chromosomique à grande échelle in vivo, chez son hôte naturel T. nautili. Nous avons réussi à reproduire ces inversions dans un système in vitro purifié, exposant ainsi les propriétés de recombinaison homologue (RH) très inhabituelles de cette enzyme. Ce projet aborde trois questions principales: (1) Quelle est la base moléculaire et structurelle de la RH promue par IntpTN3; la réaction implique-t-elle des facteurs supplémentaires? (2) La RH d’IntpTN3 HR in vitro pourrait-il élucider le mécanisme de l'appariement de séquences homologues indépendamment de la recombinaison? (3) Serait-il possible de développer des technologies innovantes de manipulation de l'ADN basées la RH d'IntpTN3 in vitro?

Partenaires

Jacques OBERTO

I2BC

(Coordinateur)

Herman VAN TILBEURGH

I2BC

Eugene GLADYSHEV

Institut Pasteur

 

Didier FLAMENT

Ifremer

 

 

Céline HENRY

Micalis